Interstate 81 este o autostradă nord-sud în estul Statelor Unite. Se întinde de la Dandridge, Tennessee, în sud, până la Wellesley Island, New York, în nord; pe o distanță totală de aproximativ 1.375,81 km (854,89 mile). Urmează Munții Apalași pe aproape toată lungimea sa.
Interstate 81 începe în Tennessee la Interstate 40 în Dandridge. Traseul urmează Munții Apalași pe o mare parte a traseului său prin Tennessee și Virginia, deservind orașe precum orașele gemene Bristol, Tennessee și Bristol, Virginia, Roanoke, Blacksburg, Lexington, Staunton, Harrisonburg și Winchester. În Harrisonburg, I-81 trece prin campusul Universității James Madison. Urmează omologul său mai vechi, U.S. Route 11, pe toată lungimea sa în Virginia.
Interstate 81 intră pentru scurt timp în partea de est a statului Virginia de Vest, deservind orașul Martinsburg. Apoi traversează statul Maryland într-unul dintre cele mai înguste puncte ale sale, trecând prin "Hub City", Hagerstown, unde se intersectează cu multe alte rute.
Interstate 81 formează un important coridor nord-sud prin statul Pennsylvania, deservind orașele Chambersburg și Carlisle, unde se întâlnește cu Pennsylvania Turnpike. Dar I-81 nu face direct legătura cu aceasta (automobiliștii trebuie să folosească US 11 pentru a se conecta). În jurul capitalei statului, Harrisburg, traseul formează secțiunea nord-estică a Capital Beltway din Pennsylvania. Ruta se îndreaptă apoi spre nord-est spre Wyoming Valley, unde deservește orașele Wilkes-Barre și Scranton, apoi se îndreaptă spre nord prin regiunea Endless Mountains spre granița de stat. Deși este semnalizată ca fiind o autostradă nord-sud, este clar nord-est-sud-vest și, ocazional, est-vest în tot statul.
Interstate 81 intră în statul New York în apropiere de Binghamton. Urmează U.S. Route 11 în direcția nord-sud, traversând o mare parte din stat. Deservește orașele Syracuse (unde se intersectează cu autostrada New York State Thruway) și Watertown. Traseul se termină la granița cu Canada, la podul Thousand Islands Bridge, unde traversează râul St. Lawrence, continuând ca un scurt conector, Highway 137, care deservește Thousand Islands Parkway și Highway 401.
Interstate 81 Corridor Coalition, o coaliție formată din șase state, a fost organizată pentru a rezolva problemele legate de Interstate 81, cum ar fi traficul de camioane și poluarea aerului. Până la 15 octombrie 2008, această comisie s-a reunit de două ori.


