Isabella de Castilia (22 aprilie 1451 - 26 noiembrie 1504) a fost o regină a Castiliei și Leonului. A fost fiica lui Ioan al II-lea de Castilia și a celei de-a doua soții a acestuia, Isabel de Portugalia.
Fratele ei, Enrique al IV-lea, care era rege al Castiliei, a vrut să o ia de nevastă. Ea dorea să se căsătorească cu cineva din Portugalia pentru a-și face un aliat politic. Ea s-a căsătorit în secret cu Ferdinand al II-lea de Aragon în 1469 și a avut cinci copii cu acesta. Cel mai tânăr a fost Ecaterina de Aragon, care s-a căsătorit cu Henric al VIII-lea al Angliei în 1509. Isabella a fost bunica lui Carlos I al Spaniei (Carol al V-lea, Împăratul Sfântului Imperiu Roman).
Când fratele Isabelei a murit, ea trebuia să fie noua regină. Fiica fratelui ei Enriques, Juana, a vrut să devină regină în locul ei. După un război, Isabella a devenit regină. În același timp, soțul Isabelei, Ferdinand, a devenit rege al Aragonului. Ei au unit ținuturile Castiliei și Aragonului în actuala Spanie. Isabella a ajutat la plata a patru dintre călătoriile lui Cristofor Columb pentru a descoperi Americile. În vremea lor, Americile erau numite "Lumea Nouă". Ea a semnat un armistițiu în 1492 care a făcut din Spania o țară creștină. După ce a murit, fiica ei, Ioana de Castilia, a devenit regină.
