În anul 340 î.Hr., Filip a adunat o mare armată macedoneană și a invadat Tracia. El i-a lăsat lui Alexandru, în vârstă de 16 ani, puterea de a conduce Macedonia în absența sa, în calitate de regent. Dar, pe măsură ce armata macedoneană avansa adânc în Tracia, tribul tracic al Maedi, care se învecina cu nord-estul Macedoniei, s-a răzvrătit și a reprezentat un pericol pentru țară. Alexandru a adunat o armată, a condus-o împotriva rebelilor și, printr-o acțiune rapidă, i-a învins pe Maedi, le-a capturat fortăreața și a redenumit-o Alexandropolis.
Alexandru a devenit rege al Macedoniei în 336 î.Hr. când tatăl său a fost asasinat. O adunare a fost organizată pentru a de orașele grecești l-a făcut strategos (general sau comandant suprem). El a folosit această autoritate pentru a lansa planurile de expansiune militară ale tatălui său. În 334 î.Hr. a invadat Asia Mică, aflată sub stăpânire persană. A început o serie de campanii care au durat zece ani. Alexandru a frânt puterea Persiei într-o serie de bătălii decisive, mai ales bătăliile de la Issus și Gaugamela. L-a răsturnat pe regele persan Darius al III-lea și a cucerit întregul ImperiuPersan. În acel moment, imperiul lui Alexandru se întindea de la Marea Adriatică până la râul Indus.
A atacat India în 326 î.Hr. și l-a învins pe regele Porus, care conducea o regiune din Punjab. Ulterior, au devenit aliați. La acea vreme, India era împărțită în sute de regate. Armata a refuzat să treacă Indusul și să lupte cu regii de pe cealaltă parte, așa că Alexandru i-a condus afară din India.
Alexandru a murit în Babilon în anul 323 î.Hr., din cauze necunoscute. Au fost sugerate otrăvirea, crima sau o febră după o bătălie. La moartea sa, el plănuia o serie de campanii care ar fi început cu o invazie a Arabiei. În anii care au urmat morții sale, o serie de războaie civile i-au sfâșiat imperiul. Mai multe state au fost apoi conduse de către Diadochi, generalii și moștenitorii supraviețuitori ai lui Alexandru. Aceștia s-au luptat și s-au cucerit reciproc. Cea mai mare bucată care a supraviețuit a fost Imperiul Seleucid.
Moștenirea lăsată de Alexandru include răspândirea culturală a ideilor și a limbii macedonene. A fondat aproximativ douăzeci de orașe care au primit numele său, cel mai important fiind Alexandria din Egipt. Așezarea coloniștilor macedoneni de către Alexandru a dus la o nouă civilizație elenistică. Semnele acesteia pot fi observate în Imperiul Bizantin la mijlocul secolului al XV-lea d.Hr. Au existat vorbitori de macedoneană în Anatolia centrală și în estul îndepărtat al Anatoliei până în anii 1920.
Când a murit, Alexandru avea doar 32 de ani.
